实时搜索: pcr检查是什么意思

pcr检查是什么意思

586条评论 6524人喜欢 6484次阅读 535人点赞
我怀疑自己的电脑中了什么病毒或木马,但用刚升过级的金山毒霸查过以后没发现病毒。可我总感觉最近电脑有些不对劲。会不会是有潜伏性病毒啊?(像CIH那样的,隐藏至发作日才发作的病毒) , HBV-DNA(实时荧光定量PCR法)低于检出限是什么意思 , 患者信息:女 29岁 内蒙古 乌海 ...

pcr-tb阴性是什么意思: pcr是聚合酶链式扩增技术,用来扩增DNA检测的。tb临床上一般指结核。所以pcr-tb简言之就是检测结核杆菌的dna,阴性就是未检测到,或者载量低。

pcr荧光定量检测下限25拷贝是什么意思:   pcr荧光定量检测下限25拷贝,意思是样本中原有目标DNA的最少数量。
  在另外的一组管子中,加入已知拷贝数的DNA同时扩增,每个管子中加入的数量是不同的,但是从最小数目到最大数目的这个范围涵盖了样本中DNA拷贝数。
  PCR反应完成后,把已知拷贝数DNA的量和PCR荧光Ct值制成标准曲线,再把待测样本的CT值和该标准曲线比对,就可以得到样本中的起始拷贝数了。

PCR产物的检测方法有哪些?都有什么原理:

PCR产物的检测方法:

琼脂糖凝胶电泳

这是实验室最常用的方法,简便易行,只需少量DNA即可进行实验。其原理是不同大小的DNA分子通过琼脂糖凝胶时,由于泳动速度不同而被分离,经溴化乙锭(EB)染色,在紫外光照射下DNA分子发出荧光而判定其分子的大小。 

用于电泳检测PCR产物的琼脂糖浓度常为1%—2%,应该使用纯度高的电泳纯级琼脂糖,这种琼脂糖已除去了荧光抑制剂及核酸酶等杂质。

(1)制胶

琼脂糖凝胶厚度约为3~5mm。过薄则加样孔样品会溢出来,过厚观察时荧光穿透不强以至有些小片段DNA带型不易分辨。如配制2%凝胶100ml,称取琼脂糖2g于三角瓶中,加入100ml 0.5×TBE液,微波炉加热2-5min,使琼脂糖完全溶解(注意不要暴沸),置室温等温度下降至60℃时,加入终浓度0.5μg/ml的EB液,充分混匀后倒板(注意排除气体)。

(2)加样和电泳

上样时一般取PCR反应液5~10μl,加入3μl溴酚兰液,充分混匀,加入凝胶加样孔中。电泳仪可用一般稳压可调中压电泳仪,电泳工作液为0.5×TBE液,接通电源,使样品由负极向正极移动。60-100V恒压电泳约30-60分钟。

(3)检测

将凝胶板放在紫外透射仪的石英玻璃台上进行检测,DNA产物与荧光染料EB形成橙黄色荧光复合物。观察各泳道是否有橙黄色荧光带出现,并与扩增时所设的阳性对照比较,判断阳性或阴性结果。也可在电泳时以标准分子量作对照,判断其扩增片段是否与设计的大小相一致。

聚丙烯酰胺凝胶电泳

聚丙烯酰胺凝胶电泳比琼脂糖凝胶电泳繁琐,但在引物纯化、PCR扩增指纹图、多重PCR扩增、PCR扩增产物的酶切限制性长度多态性分析时常用到。

聚丙烯酰胺凝胶电泳分辨DNA片段的有效范围:

(1)制胶

在两块制胶玻璃板中间放上垫片,放上制胶架,拧紧制胶螺丝夹紧玻璃板。

制备适量合适浓度的凝胶,使之略多于胶板。制备100μl体积凝胶的配制方法见下表。 

不同浓度(%)聚丙酰胺凝胶的制法:



在加入TEMED和10%过硫酸铵后,立即混匀,倒入放置45℃角的玻璃板内,完全注满(注意不要有气泡),迅速将玻璃板放置水平位置。立即放成型梳子于腔顶并夹紧,待30-60分钟胶聚合后,取下胶板,放入电泳槽中固定。

(2)加样和电泳

上下槽中加入1×TBE电泳缓冲液,溢过加样孔,拔出梳子,排出加样孔中的气泡,将PCR产物或限制性内切酶消化产物2与1上样缓冲液混匀,用微量注射器加入加样孔底部,使样品在孔底成一层,两侧孔中加入标准分子量的DNA Marker。

以2-10V/cm电压电泳,电泳时间足够长,使片断足以分开,待指示剂走到适宜位置时关闭电源,将胶片取出。

(3)银染

分开两块玻璃板,将凝胶片放入100ml银染固定液中振荡15min,双蒸水洗3次,每次2min,然后将凝胶片转入100ml 0.2%的AgNO3中于摇床上染色约10min,吸去AgNO3液,用双蒸水洗3次,每次30s,加入100ml显色液约7-10min,待DNA带显示清除时,吸去显色液,加入固定液Na2CO3,静置2-3min,取出凝胶观察。

乙型肝炎病毒定量pcr检测 低于检测《500下线什么意思: 如果你是乙肝,意思是没有检查到乙肝病毒,小于等于500,有可能还有400,或100。

我怀疑自己的电脑中了什么病毒或木马: 很多潜伏的病毒金山是杀不出来的,你可以换一换其他杀毒软件试试,比如360、小红伞等杀毒软件。如果电脑里面没有啥重要信息,可以格式化或者重新做系统。

HBV-DNA(实时荧光定量PCR法)低于检出限是什么意思: 这个检测方法有一定的检出范围。一般低于500/ml就做不出来了。也就是说你的样本中,病毒的数量低于这个值。

请问乙肝病毒实时荧光定量PCR的结果是8.22E+02最低检测下限5.00E+02是什么意思: 证明你的定量在正常范围内,病毒量很少,基本检测不出来 !

病原体DNA荧光定量PCR检测结果怎样看: 请直接上图,有图才好帮你解决问题啊,要不也不知道怎么回答您的问题哈

  • does是谁的过去式

    中国男子曲棍球队首次参加亚运会是哪一年?: 1982年第九届印度新德里亚运会:参赛队伍:巴基斯坦、印度 、马来西亚、 日本、南朝鲜 、中国等,共有9支队伍参赛。中国队成员名单:领队、教练:候正庆 裁判员:尹玉峰 翻译:戴林运动员:白丹竹 张乃武 德立英 ...

    714条评论 5694人喜欢 2701次阅读 749人点赞
  • fs传送门哪里学

    我是学电子信息工程的大一学生,请问各位大侠们电子信息工程考研考汽车机电(ARM)可以吗?: 主要是嵌入式编程!当然一般嵌入式编程,需要自己设计电路,自己布线即PCB;大型的会立项,按模块分工,多人协作。我也是电信学院,电子信息工程专业的,课程只是一笔带过,至少我们西安的学校该专业没有专门ARM课程。以上,自...

    792条评论 5205人喜欢 2440次阅读 722人点赞
  • 2014荣威几个喇叭

    太原嵌入式linux学习哪家强?: 嵌入式linux和linux下编程区别不大,不过驱动就要有硬件基础,建议去看看韦东山的教程,很不错 ...

    354条评论 2572人喜欢 5485次阅读 804人点赞
  • mp4在哪里可以下载

    求一首英语歌,欧美明星唱的,MV画面是黑色的,一个女的短发,在跳舞,歌曲类型是电音的: rihanna的who's that chick ...

    553条评论 5249人喜欢 4381次阅读 992人点赞
  • nuo字有哪些字

    我是学计算机 专业,想走linux+ARM嵌入式,需要懂电路设计吗?谢谢PCB板的设计,EDA原理什么的要懂吗?: 说实话linux+arm还有很长一段路要走,要想做硬件,画电路图印制pcb是必须的了,要不然谈何硬件工程师,加油吧,会了就比不会好,并且又不是什么坏事 ...

    919条评论 1236人喜欢 4811次阅读 820人点赞
  • 云烟小熊猫多少钱一包

    Really?是什么意思: adv.(表明事实或真相)事实上,真正地,真实地;(强调观点等)确实,的确;加强形容词或副词的语气1、读音:英 [ˈriːəli]   美 [ˈriːəli]2、例句:My father didn't really ...

    772条评论 6317人喜欢 1992次阅读 201人点赞